Particle enhanced immunoturbidimetric assays for the determination of human calprotectin

Utviklingen av antibiotika-resistente bakterier er en økende trussel for menneskets helse. I tillegg kan små infeksjoner som ikke kan behandles kan utvikle seg til blodforgiftning og bli fatale. En foreslått strategi for å bremse utviklingen av antibiotika-resistente bakterier er å redusere bruken av antibiotika. En del av denne strategien vil være å utvikle metoder som kan påvise infeksjoner raskt slik at behandlingen kan begynne tidlig før infeksjonen har utviklet seg. Ved å starte behandlingen tidlig vil mindre antibiotika være nødvendig. I dag blir CRP brukt for å påvise infeksjoner. Det tar gjerne at par dager fra infeksjonen starter til CRP verdiene er høye nok til at pasienten får behandling. Fordi calprotectin konsentrasjonen i blodet øker raskere enn CRP konsentrasjonen ved en infeksjon og fordi calprotectin kan skille bedre mellom bakterielle og virale infeksjoner, er det interessant å kunne måle calprotectin ved mistanke om infeksjon. Vi utviklet derfor en rask metode for å måle calprotectin konsentrasjonen i blodet, som kan anvendes med eksisterende rutineinstrument på sykehuslaboratorier i hele verden. Testen tar 10 minutter fra start til resultatet foreligger. I prosjektet måtte vi først utvikle metoder for å rense antigener og antistoffer, som er avgjørende råvarer i produksjonen av metoden. Deretter utviklet vi det endelige produktet som kunne testes ut klinisk. Resultatene fra den kliniske testingen viser at calprotectin er en lovende markør for tidlig påvisning av blodforgiftning.

Formålet med prosjektet er å øke bedriftens kompetansen på partikkel-forsterkede immunpartikler basert på hønseantistoffer. Som eksempel gjennom prosjektet skal det utvikles et immunoassay for bestemmelse av calprotectin i serum/plasma. Hønseantistoffer antas å ha en bedre robusthet mot interferens blandt annet fra lipid i serum/plasma pga at hønse-antistoffer gir et betydlig sterkere signal. I tillegg skal prosjektet også gi bedriften mer kunnskap om standardisering av kalibratorer. I dag finnes det ik ke noen standardisering av calprotectin. Faglig utfordring: 1.utvikle en effektiv rensemetode for calprotectin også i større skala. 2. kartlegge egenskapene/karakterisere til antistoffene og finne/optimalisere spesifisiteten til disse 3. karakterisere antigenet Calprotectin 4. tandardisere Calprotectin kalibratoren. Finne en egnet metode for å standardisere verdi-fastsettingen for å unngå variasjoner mellom lotene som blir produsert. Det finnes pr i dag ikke noen verdensstandard for Calprotectin. 5. u tvikle et assay som kvantifiserer calprotectin i serum/plasma på tvers av ulike klinisk kjemiske platformer. 6.