Nacancell

Prosjektets mål er å utvikle en ny diagnostisk testplattform som vil forenkle diagnostisering av sykdommer der a) dagens diagnostiske metoder er kostbare, tar lang tid og er en belastning for pasientene og/eller b) det er vanskelig å påvise en gitt sykdom med dagens teknologi. Hovedfokus i prosjektet vil være å utvikle en test og tilhørende diagnostisk instrumentering som ved hjelp av en enkel blodprøve vil kunne teste for Nevroblastom, en ondartet type svulst, hos barn. Dersom sykdom påvises vil den samme diagnostiske testplattformen kunne benyttes for å følge utvikling av svulsten og responsen på medisinering. Sistnevnte er et like viktig moment for motivasjonen til å utvikle denne nye testplattformen. Metoder som kan gi riktige og raske svar uten stor belastning for pasienten til en samfunnsøkonomisk pris er en vesentlig drivkraft i prosjektet. Selv om hovedfokus i prosjektet vil være mot en gitt krefttype vil den diagnostiske plattformen relativt enkelt kunne adapteres til andre krefttyper og øvrige sykdomsgrupper. Partner A har sin kjernekompetanse knyttet til utvikling av diagnostiske tester. De vil i prosjektet ha fokus på utvikling av en «hurtigtest» som bl.a. vil benytte nanopartikler for å øke sensitiviteten versus tradisjonelle «hurtigtester» Partner B har sin kjernekompetanse knyttet til design av biokjemiske molekyler som kan «skreddersys» til å gjenkjenne unike biomolekyler som vil være tilstede i en blodprøve hos en pasient som f.eks. har Nevroblastom. Partner A vil benytte de biokjemiske molekyler som utvikles av Partner B i utvikling av «hurtigtesten» Partner C har medisinsk klinisk kjernekompetanse med spesifikk kunnskap om diagnostisering og behandling av pasienter med Nevroblastom. Og kunnskap om hvilke udekkede behov som er i klinikken. Partner D (Skannex) har sin kjernekompetanse knyttet til utvikling av software og instrumentering for nøyaktig og enkelt kunne avlese og rapportere resultater fra «hurtigtester» I første del av prosjektperioden utviklet Partner A første variant av de signal "merkelapper" som skal benyttes i første prototype av hurtigtesten. Det har vært jobbet med ulik design av kjemien i hurtigtesten. Partner B utviklet og småskalasyntetiserte den første aptamer som skal testes ut i hurtigtesten. Partner C har gitt input til Partner B for utvikling av aptamer sammensetning versus PTHLH, det protein som skal detekteres i testen. Partner D har utviklet software som kan lese kolorimteriske signaler fra det test format Partner A benytter i prototypeutvikling av hurtigtesten for to ulike billedfangst metoder; skanner og kamera. Målet har vært å utvikle aptamer for N-terminalen av peptidet, men dette har vist seg å ikke være så enkelt. Aptamer for Mid-regionen har derfor blitt brukt til å videreutvikle assayet for å komme videre. I mellomtiden har det blitt brukt mye tid på å utvikle aptamer for N-terminalen. Til dette har man brukt SELEX metoden. SPR (surface plasmon resonance) analyse er brukt for å bekrefte at den selekterte apatameren selektivt binder seg til PTHLH. Partner C har evaluert PTHLH i kliniske prøver fra ulike cellelinjer for diagnosering. Partner D og partner A har diskutert utvikling av en fluorescens leser. Skannex har utviklet og gitt partner A et instrument tilpasset for lesing av både colorometrisk og fluorescens assays. Partner A har utviklet Lateral-Electrophoretic bioassay for å få tydeligere kontroll og test linjer. De har også utviklet en fluoriserende lateral flow assay (LFA) for den samme analytten. Partner A har syntetisert tre ulike nanopartikler for bruk i ulike typer av LFA: Gullpartikler til bruk i regulær kolorimetrisk LFA, oxide nanopartikler til bruk i elektroforetisk LFA og QD (Quantum Dots) for detektering av fluorescens LFA. Alle tre typer assay er utviklet med bruk av disse nanopartiklene og antistoffer for å kunne detektere PTHLH og H-IgG for bevis av konseptet. Partner D har videreutviklet den kombinerte leseren ved å ta i bruk en bedre smarttelefon og optimalisert programvare. På grunn av problemer under utviklingen av aptamer for N-terminalen bestemte partner A seg for å bestille produksjon av antistoffer mot N-terminalen. I mellomtiden fortsatte partner A arbeidet med Lateral-Electrophoretic bioassay som en strategi for deteksjon av PTHLH i komplekse prøver, slik som serum og helblod. Resultatene var veldig lovende og en Europeisk patentsøknad ble derfor sendt inn for å beskytte teknologien. Kompetetive LFA ble gjennomført for å finne optimale assay betingelser og det jobbes fortsatt med dette for å få betingelser som tilsvarer kliniske verdier. Partner A har startet utviklingen av LFA mot N-terminalen med bruk av de antistoffene de bestilte. Lateral flow leseren utviklet av Partner D har blitt brukt i dette arbeidet. Partner C har blitt trent i bruken av denne leseren for å kunne bruke den i evalueringen av de kliniske prøvene så snart assayet har blitt ferdig utviklet.

Utviklingen av lateral flow assay for deteksjon av PTHLH vil være av stor betydning i kliniske undersøkelser. Både som et diagnostik verktøy, men også til bruk i monitorering og oppfølging av pasienter. Selv om det i første omgang vil bli brukt på en bestemt type kreft (neuroblastoma), vil samme teknologi kunne brukes på andre kreftformer. Ved å bruke SkanMulti og/eller SkanEasy som instrument for avlesing av assays, vil man få objektive og presise resultater på en brukervennlig måte som gir gode rapporter og arkivering av data. Instrumentene lar seg enkelt tilpasse til avlesing av andre lateral flow assays og kan derfor også brukes for andre typer kreftfomer.Skannex har som resultat av dette prosjeket utviklet en fungerende prototype på en fluorescens leser.

NACANCELL aims at developing an innovative paper-based sensor to quantify parathyroid hormone-like hormone (PTHLH), a protein that exerts critical roles in cancer. The project will focus on neuroblastoma, a childhood cancer, but will impact the field of clinical oncology and cancer research as well through its future easy application to other biomarkers. The main objective will be to generate an innovative device to monitor PTHLH production in in vitro cancer models as well as in plasma samples of cancer patients. This will allow for a fast, easy and cost effective monitoring of cancer cells activity for research purposes, but, more importantly, it will provide a precise evaluation of tumor evolution and response to treatments in liquid biopsies of cancer patients. Although the project will focus on a particular developmental tumour, the same scenario applies for the vast majority of cancers presented in paediatric and adult patients.